蛋白质浓度测定(双缩脲法)的基本原理
蛋白质含有两个以上的肽键,因此会发生双缩脲反应。在碱性溶液中,蛋白质与Cu 2+ 形成紫红色络合物,其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比,而与蛋白质的分子量以及氨基酸成分无关。因此,可利用此进行比色,测定蛋白质含量。在一定条件下,未知样品的溶液与标准蛋白质溶液同时反应,并于540~560nm下比色,可以通过标准蛋白质的标准曲线求出未知的蛋白质浓度。标准蛋白溶液可以用结晶的牛(或人)血清白蛋白、卵清蛋白或酪蛋白粉末配制。
除—CONH—有此反应外,—CONH 2 —,—CH 2 —,NH 2 —,—CS—CS—NH 2 等基团也有此反应。