聚乙二醇(PEG)介导的细胞融合:实验原理

细胞与组织不同,不排斥异类、异种细胞。细胞融合(cell fusion)即在自然条件下或用人工方法(生物的、物理的、化学的)使两个或两个以上的细胞融合成一个细胞的过程。人工诱导的细胞融合不仅能产生同种细胞融合、种间细胞融合,而且也能诱导动植物细胞间产生融合。

诱导细胞融合的主要方法有病毒诱导融合、化学融合剂诱导融合和电融合。

1.病毒诱导融合

有许多种类的病毒能介导细胞融合,最常用的是灭活的仙台病毒(HVJ),其为RNA病毒。病毒诱导细胞融合的过程:首先是细胞表面吸附许多病毒粒子,接着细胞发生凝集,几分钟至几十分钟后,病毒粒子从细胞表面消失,而就在这个部位邻接细胞的细胞膜融合,胞质相互交流,最后形成融合细胞。

2.化学融合剂诱导融合

化学融合剂主要有高级脂肪酸衍生物、脂质体、钙离子、水溶性高分子化合物、水溶性蛋白质和多肽,其中最常用的是聚乙二醇(PEG)。PEG用于细胞融合至少有两方面的作用:

①可促使细胞凝结;

②破坏互相接触处细胞膜的磷脂双分子层,从而使相互接触的细胞膜之间发生融合,进而细胞质沟通,形成一个大的双核或多核融合细胞。

3.电融合

电融合是指细胞在电场中极化成偶极子,并沿着电力线排列成串,然后用高强度、短时程的电脉冲击穿细胞膜而导致细胞融合。

所有的细胞融合方法都有其各自的优缺点,本次实验中采用PEG诱导细胞融合的方法。

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