干扰素是干扰素诱生剂作用于有关生物细胞所产生的一类高活性、多功能蛋白质。从细胞产生和释放出来以后，又作用于相应的其他同种细胞，使其获得抗病毒及抗肿瘤、免疫调节、诱导分化等多方面的生理功能。

本实验用具有多聚组氨酸标签（His-Tag）的人α-干扰素生物工程菌，以IPTG诱导其表达α-干扰素融合蛋白（包涵体），洗涤并溶解后，用生物亲和层析及凝胶过滤层析方法进行进一步纯化和复性。

亲和分离技术是基于固定相的配基与生物分子间的特殊生物亲和能力，如酶与底物、受体配体、抗体抗原，核酸的互补链，植物凝集素和糖蛋白，金属离子和蛋白质表面的组氨酸等的特殊亲和能力，利用生物高分子能与配基分子专一识别、可逆结合的特性，来进行分离。亲和层析纯化过程简单，迅速，分离效率高，特别适合分离纯化含量低、稳定性差的生物大分子，而且纯化倍数大，产物纯度高，因此广泛应用于蛋白质纯化。

His-Tag融合蛋白是目前最常见的表达方式，它的优点是操作方便且基本不影响蛋白活性，无论表达的蛋白是可溶性的或者包涵体都可以用亲和层析进行纯化。要想得到好的纯化效果，必须选择好纯化的条件。通常His-Tag蛋白都可以在天然情况下被亲和层析柱吸附，但如果是包涵体蛋白，标签折叠在蛋白内部不容易暴露，就难纯化。此时可以在样品和平衡缓冲液中加1～2mol/L尿素，这样蛋白结构相对松散，也许能吸附而蛋白不会变性。对于本身就是变性的蛋白，如果8mol/L尿素不能吸附，改用6mol/L盐酸胍溶解样品就可以被吸附，因为盐酸胍可以打开脲打不开的结构，使得标签能暴露。当然，如果有二硫键最好加1～2mmol/L DTT也可以更好解决吸附的问题。

本实验使用亲和层析柱His Trap HP来纯化His-Tag人α-干扰素融合蛋白。