蚯蚓是土壤中生物量最大的动物类群之一，在土壤物理性状的改良以及植物营养循环方面具有重要作用。由于蚯蚓直接暴露于土壤污染物中，并对多种污染物敏感，利用蚯蚓指示土壤污染状况，已成为土壤污染生态毒理诊断的一个重要指标。评价农药对蚯蚓生态毒理的研究方法，目前主要有实验室毒理实验、田间生态毒理实验和生物检定三种方法。实验室毒性实验包括急性毒性实验和慢性毒性实验，具有较好的实用性，可以通过简单、快速和经济的方法测试某些农药对蚯蚓的毒性，从而对农药的生态毒性做出初步的判断。
目前对蚯蚓的毒性评价多采用赤子爱胜蚯蚓（Eisenia foelide）。
（1）滤纸接触
蚯蚓在填充了标准化的滤纸条的玻璃器皿中与不同浓度的化学药品接触48h 后测定其死亡率，然后通过标准化的统计方法得到LC 50 。这种方法具有快速、简便易行的优点，但是实验仅可给出通过皮肤接触所产生的毒性信息，因此不能全面评估农药对蚯蚓的真实影响。
（2）人工土壤法
农药对蚯蚓的致害途径，主要是土壤中的残留农药与蚯蚓接触或被蚯蚓吞食所致。因供试土壤种类的不同，对蚯蚓毒性的程度也有差别。为了使实验结果具有可比性，多采用人工配制的标准土壤作为实验材料。人工土壤由10％的草炭，20％的高岭豁土（高岭土大于50％），69％的工业石英砂（含50％以上0.05～0.2mm的细小颗粒）和1％的CaCO 3 （化学纯）组成。将农药按一定的级差配成5～7个浓度，分别均匀地加入1kg土壤中。调节到一定的湿度后，装于2L的培养缸中，每个处理养入个体大小相近的健壮蚯蚓10条，在（20±2）℃和有适量光照条件下进行实验。供试农药用制剂或纯品，对难溶于水的农药，可用丙酮助溶。拌入土壤后先将丙酮挥发后再做实验。蚯蚓的毒性实验需连续进行14d，于第7d与14d时测定蚯蚓的死亡率，用概率法求致死中浓度LC 50 与95％的可信限值。这种方法较真实地反映了蚯蚓生活的土壤环境，综合考虑了农药对蚯蚓的经皮毒性和经口毒性。上述方法得到的实验结果，按照LC 50 的大小将农药对蚯蚓的毒性划分为3个等级：LC 50 ＜1mg/L 的为高毒农药；LC 50 1～10mg/L 的为中毒农药；LC 50 ＞10mg/L 的为低毒农药。
（3）溶液法
将蚯蚓浸入含不同浓度化学物质的液体中，一定时间后转移至干净的土壤中，培养一段时间后调查蚯蚓的死亡率。
（4）自然土壤法
采用天然土壤为蚯蚓生活的介质，能够评价农药对某一地区的土壤生物的环境毒性情况。