农药对家蚕的毒性评价方法

家蚕是鳞翅目蚕蛾科的一种,是我国农药登记中所列环境生态的非靶标生物之一,与其他昆虫比较,一般对农药比较敏感,有时虽然中毒并没有造成死亡,但会影响蚕的体质和茧质,降低雌蛾的产卵量或使幼虫龄期不一致。因家蚕品种较多,尚难规定统一的实验品种,目前只能因地制宜,选择农药使用地区常用的家蚕品种作实验材料。

农药对家蚕影响的主要途径多半为农田施药引起桑叶污染或大气污染两种。农药对家蚕的常用毒性测定方法主要如下。

(1)食下毒叶法

将药液先浸渍桑叶,一般浸渍时间为5s,待溶剂挥发完再喂蚕,每组20条蚕,实验用农药按一定浓度级差配制成5~7个处理,并设溶剂空白对照。

(2)熏蒸法

在一较密闭的容器内,将一定浓度的药液浸渍脱脂棉置于小玻皿中,放在容器内一边,使蚕体不会接触到药液,喂以无毒桑叶。

(3)口器注射法

将药剂配制成不同浓度药液,用5μL注射器针向家蚕口器中注入1μL药液,处理后的家蚕用新鲜无毒桑叶饲养。

(4)药膜法

将药剂用丙酮配制成不同浓度的药液,在培养皿中铺一张滤纸,用注射器或移液枪加入1mL药液,待丙酮挥发掉后,在滤纸上形成均匀的药膜,放入家蚕,让其在滤纸上爬行一定时间(一般为1min)后,转入干净的培养皿中用新鲜无毒的桑叶喂养。实验在25~27℃下微光环境进行,记录24h、48h的死亡率,用DPS软件或概率值法(EXCEL)求出LC 50 或LD 50 及95%可信限与相关系数。

农药对家蚕96h的急性毒性按LC 50 的大小划分为4个等级:低毒,LC 50 >200mg/L;中等毒性,20mg/L<LC 50 ≤200mg/L;高毒,0.5mg/L<LC 50 ≤20mg/L;剧毒,LC 50 ≤0.5mg/L。

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