酵母中含有丰富的蔗糖酶，可作用于α-1，2-β糖苷键，并将蔗糖水解为葡萄糖和果糖，最适pH值为3.5～5.5。本实验以酵母为原料，通过破碎细胞方法得到粗酶，然后通过热处理、乙醇沉淀、离子交换柱层析等步骤，纯化蔗糖酶，并对纯化的蔗糖酶进行纯度测定。

离子交换层析是常用的层析方法之一。

它是在以离子交换剂为固定相、液体为流动相的系统中进行的。离子交换剂与水溶液中离子或离子化合物的反应主要以离子交换方式进行，或者借助离子交换剂上电荷基团对溶液中离子或离子化合物的吸附作用进行，这些过程都是可逆的。在某一pH的溶液中，不同的蛋白质所带的电荷存在差异，因而与离子交换剂的亲和力就有区别。当洗脱液的pH改变或者盐的离子强度逐渐提高时，使某一种蛋白质的电荷被中和，与离子交换剂的亲和力降低，不同的蛋白质按所带电荷的强弱逐一被洗脱下来，达到分离的目的。

尿糖试纸的原理：

尿糖试纸是将葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶及无色的化合物固定在纸条上，制成的测试尿糖含量的酶试纸。溶液（或尿液）中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化作用下，形成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化氢酶的催化作用下形成水和氧，氧可将无色的化合物氧化成有色的化合物。当这种酶试纸与溶液（或尿液）相遇时，很快就会因溶液（或尿液）中葡萄糖含量的少到多而依次呈现出浅蓝、浅绿、棕或深棕色。尿糖试纸是固定化酶实际应用的范例之一。