酵母RNA的提取：实验原理

核酸（RNA）是一类不稳定的生物大分子，在制备过程中很容易发生降解。因此，要使制得的核酸尽可能保持其在生物体内的天然状态，制备核酸必须采取温和的条件，例如避免过酸过碱，避免剧烈的搅拌，防止核酸降解酶类的作用。

由于RNA种类较多，所以制备方法也各异。工业上制备RNA一般选用成本较低、适宜于大规模操作的稀碱法和浓盐法。稀碱法是用1%NaOH溶液，将细胞壁溶解，用酸中和，升高温度使蛋白质变性，将蛋白质与核酸分离，然后除去菌体，将pH调至RNA的等电点（pH=2.5），使RNA沉淀出来。稀碱法的优点是抽提时间短，但RNA在此条件下不稳定，容易分解。浓盐法是用10%NaCl溶液改变细胞膜的通透性，使核酸从细胞内释放出来，该法提取RNA时要注意掌握温度，避免在20~70℃之间停留时间过长，因为这是磷酸二酯酶和磷酸单酯酶作用活跃的温度范围，会使RNA因降解而降低提取率。利用加热至90~100℃，使蛋白质变性，破坏该酶类，有利于RNA的提取。

若要提取接近天然状态RNA,可采用苯酚法或氯仿-异戊醇法去蛋白，然后用乙醇沉淀RNA,离心收集。

本实验采用浓盐法（10%NaCl）。