什么是大肠杆菌高密度发酵培养基

重组大肠杆菌的高密度培养是增加重组蛋白产率的最有效方法。

根据Riesenberg 的计算,大肠杆菌最高菌体密度理论上可达400g·L-1干重(DCW),考虑培养基和其他因素后,最高菌体密度仍可达200g·L-1(DCW)。重组大肠杆菌高密度培养除与表达系统、培养方式、发酵条件控制等多种因素有关,还与培养基密切相关。

在高密度培养中,由于葡萄糖是碳源中最易利用的糖,所以常被作为培养基的碳源。氨水常作为主要氮源,在培养过程中以流加的方式加入,既可充当氮源又可调节反应体系的ph。

想要获得高密度菌体,尚需在培养基中添加能促进细胞的生长和产物形成的有效物质:如少量的酵母粉、蛋白胨等天然物质可加速菌体生长缩短发酵周期;一些盐类,如MgSO4 、CaCl2 、 FeSO4等,与细胞外产物合成的动力学平衡有关,可稳定目的产物;K+、Cu2 +、Co2 +、Mn2 +、Zn2 +等痕量离子,his、Leu、Trp、Thr、Glu等氨基酸,维生素B1等维生素可促进菌体细胞的代谢,有利于菌体的高密度和高表达。但这些营养物质的浓度必须保持在合适的范围内,浓度超过一定的限度可使菌体生长受到抑制。

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