海带多糖的提取与含量测定:实验原理

1.海带多糖的理化性质

海带为海带科一种大型海藻海带( Laminaria japonica Aresch.),是重要的经济海藻。海带被誉为天然的海洋保健食品,在我国有悠久的食用和药用历史,其中多糖是其主要活性成分。海带多糖(polysaccharide from Laminaria japonica )是存在于海带细胞间和细胞内的一类天然生物大分子物质,具有免疫调节、抗肿瘤、降血脂、降血糖、抗辐射、抗突变、抗凝血、抗疲劳、抗脂质过氧化等多方面的药理作用,在医药、食品、化妆品、农业等领域具有广泛的应用前景。

目前,从海带中分离已发现了三种多糖:

(1)褐藻胶(algin),一般指褐藻酸盐类,湿基含量为19%左右,是由α-(1→4)-L古洛糖醛酸(gulonic acid,G)和β-(1→4)-D-甘露糖醛酸(mannuronic acid,M)为单体构成的嵌段共聚物。

(2)褐藻糖胶(fucoidan),湿基含量在0.3%~1.5%,其主要成分是岩藻多糖,即α-L-岩藻糖-4-硫酸酯的多聚物,以(1→3)键和(1→4)键键合,同时还含有不同比例的半乳糖、木糖、葡萄糖醛酸和少量蛋白质。

(3)褐藻淀粉(laminaran),又称昆布糖,有水溶性和非水溶性两种,主要由葡萄糖的多聚物组成,湿基含量在1%左右。

褐藻酸钠,白色丝状物,溶于水,不溶于乙醇、丙酮、氯仿等有机溶剂,经醋酸纤维素薄膜电泳呈单一色带,凝胶柱色谱为一对称峰,考马斯亮蓝染色反应呈阴性,苯酚-硫酸反应、硫酸咔唑反应呈阳性,费林试剂、碘-碘化钾反应呈阴性,电导率为256μS/cm (5 mg/mL),pH为6.12(2 mg/mL),特性黏度 η 为84.0×10 -3 Pa·s(1 mg/mL),相对分子质量大于2万。

褐藻糖胶,乳白色粉末,溶于水,不溶于乙醇、丙酮、氯仿等有机溶剂,经醋酸纤维素薄膜电泳呈单一色带,凝胶柱色谱为一对称峰,考马斯亮蓝染色反应呈阴性,苯酚-硫酸反应、硫酸-咔唑反应呈阳性,费林试剂、碘-碘化钾反应呈阴性,电导率为65μS/cm (5 mg/mL),pH为6.46(2 mg/mL),特性黏度 η 为6.12×10 -3 Pa·s(5.0 mg/mL),相对分子质量大于2万,且较褐藻酸钠的分子量小。

昆布多糖F ,白色多糖,经聚丙烯酰胺凝胶电泳均为一蓝色斑点,SephadexG-200柱色谱为一对称峰,其中含有岩藻糖、半乳糖、木糖,物质的量比为3.4∶1∶0.5,相对分子量为1.8×10 

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