4.多糖检识与含量测定原理
(1)α-萘酚-浓硫酸(Molish)反应
单糖、低聚糖和多糖都能在浓硫酸作用下脱水生成糠醛衍生物,衍生物与α-萘酚的缩合物呈紫色。反应机理如图4-8所示。
图4-8 Molish反应机理示意图
(2)糖醛酸的显色反应
咔唑(carbazole)-硫酸试剂和己糖醛酸反应2 h后溶液呈紫色,1 h内稳定,在535nm处有最大吸收。D-半乳糖醛酸、D-甘露糖醛酸的消光系数,分别是D-葡糖糖醛酸的消光系数120%和19%,可用于糖醛酸的比色测定。
(3)苯酚-硫酸法测定多糖含量
苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸(或甲苯衍生物)发生显色反应,己糖在490nm(戊糖及糖醛酸在480nm)处有最大吸收,吸收值与糖含量呈线性关系。